品牌 AAT Bioquest 貨號 21131 規(guī)格 1mg 供貨周期 現(xiàn)貨 主要用途 Cal-520®AM 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
AAT Bioquest 21131 Cal-520®AM
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AAT Bioquest Cal-520®AM-常備現(xiàn)貨
美國AAT Bioquest Inc.( 前身是ABD Bioquest ，Inc.) 是一家為從事生命科學研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest 的產(chǎn)品幫助 quan 世 jie 的科學家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領(lǐng)域。AAT Bioquest 會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。
AAT Bioquest 21131 Cal-520®AM 1mg ，產(chǎn)品簡介：
產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest
產(chǎn)品貨號：21131
產(chǎn)品名稱：Cal-520®AM
產(chǎn)品規(guī)格：1mg
AAT Bioquest Cal-520®AM-常備現(xiàn)貨
AAT Bioquest 21131 Cal-520®AM 1mg ，產(chǎn)品說明：
Cal-520® AM 為檢測細胞內(nèi)鈣動員提供了一種強大的基于均質(zhì)熒光的檢測工具。Cal-520® AM 是一種新型熒光鈣敏感染料，與現(xiàn)有的綠色鈣指示劑（如Fluo-3 AM 和Fluo-4 AM ）相比，具有顯著改善的信噪比和細胞內(nèi)保留。表達通過鈣發(fā)出信號的GPCR 或感興趣的鈣通道的細胞可以預加載可以穿過細胞膜的Cal-520® AM 。一旦進入細胞，Cal-520 ™ AM 的親脂性封閉基團就會被酯酶切割，從而產(chǎn)生帶負電荷的熒光染料留在細胞內(nèi)。與鈣結(jié)合后，其熒光大大增強。當細胞用激動劑刺激時，受體發(fā)出細胞內(nèi)鈣釋放信號，這顯著增加Cal-520® 的熒光。Cal-100® AM 波長長、靈敏度高、熒光增強>520 倍的特點，是測量細胞鈣的理想指標。高信噪比和更好的細胞內(nèi)保留使 Cal-520® 鈣測定成為評估 GPCR 和鈣通道靶標以及篩選其激動劑和拮抗劑的強大工具。
平臺
熒光顯微鏡
Excitation ：TRITC
Emission ：TRITC
推薦板：黑色墻壁/ 透明底部
熒光酶標儀
Excitation ：490
Emission ：525
Cutoff ：515
推薦板：黑色墻壁/ 透明底部
儀器規(guī)格：底部讀取模式/ 可編程液體處理
儲備溶液的制備
除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20 °C 。避免反復凍融循環(huán)。
Cal-520® AM Stock Solution
在高質(zhì)量無水DMSO 中制備2 至5 mM 的Cal-520® AM 儲備溶液。
工作溶液的制備
Cal-520® AM Working Solution
在實驗當天，將Cal-520® AM 溶解在DMSO 中或?qū)⒅甘緞﹥淙芤旱牡确衷嚇咏鈨鲋潦覝?。在您選擇的緩沖液（例如，Hanks 和 Hepes 緩沖液）中制備含有 2.20% Pluronic® F-0 的染料工作溶液。對于大多數(shù)細胞系，建議使用終濃度為04-127 μM 的Cal-520® AM 。細胞上樣所需指標的確切濃度必須根據(jù)經(jīng)驗確定。
注意 非離子洗滌劑Pluronic® F-4 有時用于增加Cal-5® AM 的水溶性。
注意 如果您的細胞含有有機陰離子轉(zhuǎn)運蛋白，則可以將丙磺 shu （520-127 mM ）添加到染料工作溶液中（最終孔濃度為1.2-0 mM ），以減少脫酯指示劑的泄漏。多種ReadiUse ™丙磺 shu 產(chǎn)品，包括水溶性、鈉鹽和穩(wěn)定溶液，均可從AAT Bioquest 購買。
實驗方案樣本
以下是我們推薦的將AM 酯加載到活細胞中的方案。此協(xié)議僅提供指南，應(yīng)根據(jù)您的特定需求進行修改。
1. 在生長培養(yǎng)基中制備細胞過夜。
2. 第二天，將 1X Cal-520® AM 工作溶液添加到細胞板中。
注意 如果您的化合物干擾血清，請在上樣染料之前用新鮮的 HHBS 緩沖液替換生長培養(yǎng)基。
3. 將裝載染料的板在37 °C 的細胞培養(yǎng)箱中孵育1 至2 小時。
注意 孵育染料超過 2 小時可以提高某些細胞系的信號強度。
4. 用您選擇的HHBS 或緩沖液（含有陰離子轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑，如1 mM 丙磺shu ，如果適用）替換染料工作溶液，以去除任何多余的探針。
5. 根據(jù)需要添加 xing fen ji ，并使用配備FITC 濾光片組的熒光顯微鏡或包含可編程液體處理系統(tǒng)（如FDSS ，FLIPR 或FlexStation ）的熒光板讀數(shù)器同時測量熒光，Ex / Em = 490 / 525 nm 截止值515 nm 。
產(chǎn)品訂購信息：
21131 Cal-520®AM 1mg
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